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    其他 / 聚合酶鏈式反應

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    聚合酶鏈式反應名詞解釋

    聚合酶鏈式反應跟DNA是有聯系的,那么聚合酶鏈式反應名詞解釋是什么呢?

    聚合酶鏈式反應(PCR)是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術,它可看作是生物體外的特殊DNA復制,PCR的最大特點是能將微量的DNA大幅增加。因此,無論是化石中的古生物、歷史人物的殘骸,還是幾十年前兇殺案中兇手所遺留的毛發、皮膚或血液,只要能分離出一丁點的DNA,就能用PCR加以放大,進行比對。這也是“微量證據”的威力之所在。

    由1983年美國Mullis首先提出聚合酶鏈式反應設想,1985年由其發明了聚合酶鏈反應,即簡易DNA擴增法,意味著PCR技術的真正誕生。到如今2013年,PCR已發展到第三代技術。1976年,中國科學家錢嘉韻,發現了穩定的Taq DNA聚合酶,為PCR技術發展也做出了基礎性貢獻。

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    聚合酶鏈式反應原理

    聚合酶鏈式反應相對比較準確,那么聚合酶鏈式反應原理是什么來的呢?

    聚合酶鏈式反應原理就是DNA半保留復制。在細胞分裂之前,DNA復制過程復制了遺傳信息,這避免了在不同細胞世代之間的轉變中遺傳信息的丟失。 在真核生物中,DNA存在于細胞核內稱為染色體的結構中。在沒有細胞核的其它生物中,DNA要么存在于染色體中要么存在于其它組織(細菌有單環雙鏈DNA分子,而病毒有DNA或RNA基因組)。在染色體中,染色質蛋白如組蛋白、共存蛋白和凝聚蛋白將DNA在一個有序的結構中。這些結構指導遺傳密碼和負責轉錄的蛋白質之間的相互作用,有助于控制基因的轉錄。

    DNA的雙螺旋通過在兩條鏈上存在的含氮堿基之間建立的氫鍵來穩定。組成DNA的四種堿基是腺嘌呤(A)、胞嘧啶(C)、鳥嘌呤(G)和胸腺嘧啶(T)。所有四種堿基都具有雜環結構,但結構上腺嘌呤和鳥嘌呤是嘌呤的衍生物,稱為嘌呤堿基,而胞嘧啶和胸腺嘧啶與嘧啶有關,稱為嘧啶堿基。

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    聚合酶鏈式反應過程

    聚合酶鏈式反應需要一定的時間,那么聚合酶鏈式反應過程是什么樣的呢?

    聚合酶鏈式反應步驟分為三步:聚合酶鏈式反應DNA變性(90℃96℃):雙鏈DNA模板在熱作用下,氫鍵斷裂,形成單鏈DNA聚合酶鏈式反應退火(60℃65℃):系統溫度降低,引物與DNA模板結合,形成局部雙鏈。

    DNA骨架結構是由磷酸與糖類基團交互排列而成。組成脫氧核糖核酸的糖類分子為環狀的2-脫氧核糖,屬于五碳糖的一種。磷酸基團上的兩個氧原子分別接在五碳糖的3號及5號碳原子上,形成磷酸雙酯鍵。這種兩側不對稱的共價鍵位置,使每一條脫氧核糖核酸長鏈皆具方向性。雙螺旋中的兩股核苷酸互以相反方向排列,這種排列方式稱為反平行。脫氧核糖核酸鏈上互不對稱的兩末端一邊叫做5端,另一邊則稱3端。脫氧核糖核酸與RNA最主要的差異之一,在于組成糖分子的不同,DNA為2-脫氧核糖,RNA則為核糖。

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    聚合酶鏈式反應實驗目的

    聚合酶鏈式反應成本比較高,那么做聚合酶鏈式反應實驗目的是什么呢?

    聚合酶鏈式反應實驗可將極其微量的DNA擴增放大數百萬倍,用于DMA檢測,極大地提高了靈敏度,理論上可檢測到每個細胞分子DNA的水平,這一方法被廣泛應用于病毒的檢測鑒定中。隨著PCR技術 在植物檢疫方面的應用,其檢出率高、準確性高、操作方便及檢疫時間短等優點已充分體現出來,在不斷完善、發展PCR技術過程中,這一技術必將在植物鑒定檢疫領域發揮出更大的作用。

    本身DNA是高分子聚合物,其溶液為高分子溶液,具有很高的粘度,可被甲基綠染成綠色。DNA對紫外線(260nm)有吸收作用,利用這一特性,可以對DNA進行含量測定。當核酸變性時,吸光度升高,稱為增色效應;當變性核酸重新復性時,吸光度又會恢復到原來的水平。較高溫度、有機溶劑、酸堿試劑、尿素、酰胺等都可以引起DNA分子變性,即DNA雙鏈堿基間的氫鍵斷裂,雙螺旋結構解開—也稱為DNA的解螺旋。

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