聚合酶鏈式反應有多肽聚合酶鏈式反應,那么多肽聚合酶鏈式反應的名詞解釋是什么呢?
多肽聚合酶鏈式反應又稱“體外的基因擴增”是由美國某公司和加利福尼亞大學于1985年共同合作開發的一項基因工程技術。這一技術可以在幾個小時內將pg(10-9g)水平的單鏈拷貝序列擴增至上百萬倍,已廣泛的在于多領域得到了應用。近些年來,PCR技術得到了不斷的完善,并衍生出了多種PCR技術(如反向PCR、多重PCR等技術)以及與PCR技術相關聯的其它新技術(如RAPD、AFLP等分子標記技術)。
本身肽是α-氨基酸以肽鍵連接在一起而形成的化合物,是蛋白質水解的中間產物。由兩個氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫做二肽,同理類推還有三肽、四肽、五肽等。由三個或三個以上氨基酸分子組成的肽叫多肽。
多肽聚合酶鏈式反應不難操作的,具體多肽聚合酶鏈式反應操作過程什么呢?
多肽聚合酶鏈式反應操作過程:先模板DNA的變性:模板DNA經加熱至94℃左右一定時 聚合酶鏈式反應間后,使模板DNA雙鏈或經PCR擴增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結合,為下輪反應作準備;模板DNA與引物的退火(復性):模板DNA經加熱變性成單鏈后,溫度降至40~60℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結合。
引物的延伸:DNA模板--引物結合物在DNA聚合酶的作用下,于72℃左右,以dNTP為反應原料,靶序列為模板,按堿基配對與半保留復制原理,合成一條新的與模板DNA鏈互補的半保留復制鏈重復循環變性--退火--延伸三過程,就可獲得更多的“半保留復制鏈”,而且這種新鏈又可成為下次循環的模板。每完成一個循環需2~4分鐘,2~3小時就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍。
多肽聚合酶鏈式反應是基因工程技術來的,那么多肽聚合酶鏈式反應原理是什么呢?
多肽聚合酶鏈式反應原理大概就是通過某種技術加溫降溫,加入適量特種物質,將對生物來說鑰匙一樣的dna,只需要幾個鑰匙齒痕就可以利用它的自我復制性不斷擴展成了一大串以百萬計的相關鑰匙組,從而打開有關生物的各種大門,從而揭開關于該生物更多的秘密。
而一般肽中含有的氨基酸的數目為二到九,根據肽中氨基酸的數量的不同,肽有多種不同的稱呼:由兩個氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫做二肽,同理類推還有三肽、四肽、五肽等。由三個或三個以上氨基酸分子組成的肽叫多肽,它們的分子量低于10,000Da,能透過半透膜,不被三氯乙酸及硫酸銨所沉淀。也有文獻把由2~10個氨基酸組成的肽稱為寡肽(小分子肽);10~50個氨基酸組成的肽稱為多肽;由50個以上的氨基酸組成的肽就稱為蛋白質,換言之,蛋白質有時也被稱為多肽。
多肽聚合酶鏈式反應不是什么情況都能做的,那么多肽聚合酶鏈式反應的局限性是什么呢?
多肽聚合酶鏈式反應所需的主要硬件是熱循環儀,這是一種能夠快速加熱和冷卻樣品管的機器,并能在特定的時間內將樣品管保持在精確的溫度。盡管三十年的發展和競爭極大地改進了這些機器,但它們仍然相對笨重、耗電和昂貴。因此,作為現代分子生物學的一項關鍵性技術,多肽聚合酶鏈式反應仍然無法為一些教育工作者所使用,在許多偏遠地區也無法使用。
還有多肽聚合酶鏈式反應的大多數熱循環儀使用Peltier結來控制溫度,Peltier結是一種能夠在加熱和冷卻之間快速切換的熱電裝置。不幸的是,Peltier結效率低下,操作這些結點所需的元件使熱循環儀變得笨重且耗電量大。
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