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結核桿菌聚合酶鏈式反應

結核桿菌聚合酶鏈式反應的原理

結核桿菌聚合酶鏈式反應的操作過程

結核桿菌聚合酶鏈式反應是什么意思

結核桿菌聚合酶鏈式反應的局限性

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結核桿菌聚合酶鏈式反應的原理

結核桿菌可以做結核桿菌聚合酶鏈式反應，那么結核桿菌聚合酶鏈式反應的原理是什么呢？

結核桿菌聚合酶鏈式反應以人型結核桿菌基因組 DNA 為模板，合成二段引物各20個堿基進行聚合酶鏈式反應，經瓊脂糖凝膠電泳證實，獲得一條245bp擴增帶。PCR 檢測的敏感性染色體基因組DNA 為1pg，菌懸液為13個活菌/ml，在特異性試驗中，人型結核桿菌，牛型結核桿菌，BCG可見此擴增帶，被試的其它14種抗酸菌以及變鉛青鏈霉菌，大腸桿菌質粒 PUC19，星狀諾卡氏菌，紅球菌均未見該擴增帶。

目前54例肺結核痰標本3種方法檢查的陽性率分別為：萋尼氏抗酸染色16.7%，培養法14.8%，PCR 37.0%。前2種檢查方法分別與 PCR 比較，經統計學處理均有顯著性差異(P0.01)，12例非結核性肺部疾患痰標本抗酸染色和 PCR 均為陰性。結果表明，聚合酶鏈式反應是快速，敏感，特異診斷結核病的方法。

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結核桿菌聚合酶鏈式反應的操作過程

結核桿菌聚合酶鏈式反應結果比較精準，那么結核桿菌聚合酶鏈式反應的操作過程是什么樣的呢？

結核桿菌聚合酶鏈式反應的操作過程：模板DNA加熱變性；引物與它的靶序列發生退火，引物DNA量多，使引物和模板在局部形成雜交鏈；4種dNTP 與 Mg2+ 存在的條件下，DNA合成酶催化以引物為起始點，按5-3方向進行延伸。上面三步為一個循環，可使拷貝數到達2*Ｅ－6-2*Ｅ－7。

結核分枝桿菌，俗稱結核桿菌，是引起結核病的病原體。其細菌壁既沒有革蘭陽性菌的磷壁酸，也沒有革蘭陰性菌的脂多糖。1882年由德國細菌學家郭霍發現并證明為人類結核病的病原菌，該菌可侵犯全身各器官，但以引起肺結核最多見。結核病是一種古老的疾病，全球廣泛分布，是細菌感染性疾病致死的首位原因。

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結核桿菌聚合酶鏈式反應是什么意思

結核桿菌是能致病的一種菌種，那么關于結核桿菌聚合酶鏈式反應是什么意思呢？

結核桿菌聚合酶鏈式反應是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術，用于檢測結核桿菌的情況。結核病是由于結核分枝桿菌引起的慢性傳染病。結核分枝桿菌，俗稱結核桿菌，它十分小且看不到，但危害非常大。結核分枝桿菌在人體血液和氧氣充足的部位繁殖最快，因此常見于肺部。

結核桿菌毒力弱，人體抵抗力強，人體抵抗力會將結核桿菌直接殺死，人體沒有任何癥狀，不會發病，不被我們所察覺。結核病中最常見的是發生在肺部的結核，即肺結核，它占所有結核病的85%左右。除了肺結核，還有肺外其他部位發生的結核，包括腸結核、骨結核、神經系統結核、腦結核等等，這些結核病占所有結核病的15%左右。

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結核桿菌聚合酶鏈式反應的局限性

結核桿菌聚合酶鏈式反應不是什么情況都準確的，那么結核桿菌聚合酶鏈式反應的局限性是什么呢？

結核桿菌聚合酶鏈式反應的反轉錄酶活性需要二價錳離子，而二價錳離子會降低ＤＮＡ聚合酶的忠實性，DNA聚合酶，又稱DNA依賴的DNA聚合酶，它是以親代DNA為模板，催化底物dNTP分子聚合形成子代DNA的一類酶。此酶最早是美國科學家Arthur Komberg于1957年在大腸桿菌中發現的，被稱為DNA聚合酶Ⅰ（DNA polymerase Ⅰ，簡稱polⅠ）以后陸續在其他原核生物及真核生物中找到了多種DNA聚合酶。

這些DNA聚合酶的共同特征為：具有5’→3’聚合酶活性，這就決定了DNA只能沿著5’→3’方向合成；需要引物，DNA聚合酶不能催化DNA新鏈從頭合成，只能催化dNTP加入核苷酸鏈的3-OH末端。因而復制之初需要一段DNA引物的3’一OH端為起點，合成5’→3’方向的新鏈。

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