HIV抗體檢測怎么做
收藏HIV抗體檢驗一般有兩種方法,一種是酶聯(lián)法,它的中心就是讓抗體與酶復合物結(jié)合,然后通過顯色來檢測。第二種是快速法,即“金標法”,測定結(jié)果僅憑特制的檢測試紙在短時間內(nèi)即可獲得。
1、酶聯(lián)法 :即“酶聯(lián)免疫法”,簡稱ELISA。它的中心就是讓抗體與酶復合物結(jié)合,然后通過顯色來檢測。步驟很簡單:ELISA用血清來檢測,首先血液要經(jīng)過至少半個小時的凝集,然后取血清。將酶復合物用稀釋液稀釋后,加血清及陰性、陽性對照,還有質(zhì)控品。經(jīng)過一個小時的孵育,然后洗板,加底物,半個小時避光反應后加終止液即完成反應部分,然后讀數(shù)。由數(shù)值來判斷結(jié)果的陰性或陽性。
嚴格的講,如果第一次檢測為陽性的話,無論是哪個實驗室,必須按照CDC的HIV操作規(guī)程來進行第二次檢測,第二次的方法必須與第一次的不同,如還是陽性,將送艾滋病確認實驗室確認。
2、快速法 :即“金標法”,又叫“膠體金法”,金標法是國際上較為先進的靈敏,特異,快速,簡便,準確率高的體外診斷方法。測定結(jié)果僅憑特制的檢測試紙在短時間內(nèi)即可獲得。金標法(艾滋病檢測試紙),取血后滴在試紙上,用15分鐘的時間觀察該試紙有無顏色變化。
艾滋病快速檢測法可以在家里自己檢測,操作簡單方便,不需要特殊的儀器,在艾滋病試紙上先滴兩滴血,再滴一滴稀釋液,然后等待15分鐘讀取結(jié)果。結(jié)果判讀也很簡單,如果試紙上出現(xiàn)一條紅色的直線,說明是陰性,如果是兩條紅線,就是陽性。如果檢測出現(xiàn)陽性,按照HIV檢測流程,需要進行復測。
使用快速法(艾滋病試紙)進行艾滋病自我檢測應該在專業(yè)人員指導下進行,以確保整個自測操作過程規(guī)范正確,結(jié)果準確可靠。
3、蛋白免疫印跡法(WB)
艾滋病確診實驗室常用的方法,主要用于確認試驗,當初篩出現(xiàn)陽性時,需采用此方法進行確認實驗。基本原理是HIV全病毒抗原經(jīng)過SDS-PAGE電泳,將分子量大小不等的蛋白帶分離開來,然后再把這些已經(jīng)分離的不同蛋白帶電轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上。將此膜切割成條狀,每一條硝酸纖維素膜上均含有經(jīng)電泳分離過的HIV病毒抗原。將待檢血清樣品用稀釋液稀釋成1/100,再把它直接加到硝酸纖維素膜上,恒溫震蕩,使其充分接觸反應。血清中若含有抗HIV抗體,就會與膜條上的抗原帶相結(jié)合。加入抗人IgG酶結(jié)合物和底物后,即可使有反應的抗原抗體結(jié)合帶呈現(xiàn)紫褐色,根據(jù)出現(xiàn)條帶情況判定結(jié)果。
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