pcr聚合酶鏈式反應步驟
收藏pcr聚合酶鏈式反應不是一步到位的,那么pcr聚合酶鏈式反應步驟是什么呢?
實驗器具與材料:移液槍:200ul、10ul;吸頭:200ul、20ul;吸頭臺:放置200ul和20ul的吸頭一個;EP管1.5ml、100ul;塑料制品:(包括吸頭、EP管等)送至高壓3次,試驗前將槍頭放入吸頭臺。雙蒸水100ml鹽水瓶內裝40ml蒸餾水,送至高壓,后分裝到幾個1。5mlEP管中,-20℃中保存備用。
然后準備100ul EP管,依次在管中加入50ul反應體系),稍離心,100℃沸水浴1分鐘,趁熱加入Tag酶0.5ul(冰上操作),再加入50ul液體石蠟封閉,10000rmp離心1分鐘,進行40個循環,然后72℃10min 完后4℃保溫。10000rmp離心5min,將下層水相轉入新的0.65mlEP管中,-20℃保存。
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