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    逆轉錄聚合酶鏈式反應實驗目的

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    逆轉錄聚合酶鏈式反應通常在實驗室進行,那么逆轉錄聚合酶鏈式反應實驗目的是什么呢?

    逆轉錄聚合酶鏈式反應實驗目的就在于獲得目的基因或檢測基因表達。RT-PCR使RNA檢測的靈敏性提高了幾個數量級,使一些極為微量RNA樣品分析成為可能。

    注意逆轉錄聚合酶鏈式反應在實驗過程中要防止RNA的降解,保持RNA的完整性。在總RNA的提取過程中,注意避免mRNA的斷裂。為了防止非特異性擴增,必須設陰性對照。逆轉錄聚合酶鏈式反應內參的設定主要為了用于靶RNA的定量。常用的內參有G3PD(甘油醛-3-磷酸脫氫酶)、β-Actin(β-肌動蛋白)等。其目的在于避免RNA定量誤差、加樣誤差以及各PCR反應體系中擴增效率不均一各孔間的溫度差等所造成的誤差。

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